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Xstrahl in Aktion: Identifizierung von Proteinzielen für AVM-Molekulartherapien

9. April 2019

Aktuelle Behandlungsmethoden der arteriovenösen Malformation (AVM) sind Chirurgie und Radiochirurgie. Allerdings wird nach der Radiochirurgie innerhalb von 3 Jahren ein vollständiger Verschluss erreicht, während für den Patienten weiterhin das Risiko einer Blutung besteht. Daher ist es wichtig, eine neue molekulare gezielte Behandlung für das Gehirn zu entwickeln, indem Membranproteine ​​identifiziert werden, die auf dem AVM-Endothel lokalisiert sind.

In ihrer Studie“Identifizierung von Proteinzielen in zerebralen Endothelzellen für molekulare Therapien arteriovenöser Malformationen (AVMs) des Gehirns.„Simonian M, Loo RRO, Rannulu N, Loo JA, Molloy MP, Stoodley MA zielen darauf ab, potenzielle Proteinziele in AVM-Endothelzellen zu identifizieren, die diese Gefäße von normalen Gefäßen unterscheiden; Diese Proteinziele wurden für die molekulare Therapie von Gehirn-AVMs untersucht, um eine schnelle Thrombose nach einer Radiochirurgie zu fördern.

Sie beschäftigten in vitro Biotinylierung, die sie mit dem entwickelt haben Xstrahl CIX3und Massenspektrometrie zum Nachweis von zelloberflächenexponierten Proteinen in Kulturen muriner Gehirnendothelzellen. Zwei Formen der Massenspektrometrie wurden angewendet (iTRAQ-MS und MSE), um die Membranproteinexpression zu verschiedenen Zeitpunkten nach der Bestrahlung zu identifizieren und zu quantifizieren, was einen radiochirurgischen Behandlungsansatz simuliert. Mithilfe der Immunzytochemie wurde die Expression ausgewählter Membranproteine ​​​​bestätigt. Zur Analyse der iTRAQ-MS-Daten wurde die Software ProteinPilot V4.0 verwendet, und die MSE-Daten wurden mit der Software ProteinLynx Global Server Version 2.5 analysiert.

Die Proteomikdaten zeigten mehrere unterschiedlich exprimierte Membranproteine ​​zwischen bestrahlten und nicht bestrahlten Zellen zu bestimmten Zeitpunkten, z. B. PECAM-1, Cadherin-5, PDI, EPCR und Integrine. Immunzytochemische Daten bestätigten die Expression dieser Proteine.

Durch die Biotinylierung von Zelloberflächenproteinen und die Proteomikanalyse konnten Membranproteine ​​aus Endothelzellen des Mausgehirns als Reaktion auf Bestrahlung erfolgreich identifiziert werden. Diese Arbeit schlägt potenzielle Zielproteinmoleküle für die Bewertung in Tiermodellen der Gehirn-AVM vor.
 
Dieser Xstrahl In Action wurde einem Artikel entnommen, der auf der Website der National Library of Medicine gefunden wurde.

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